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- 首頁 >> 羊的凍精生產程序
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一． 種公羊飼養管理
種公羊的精液好壞與飼養管理，運動和采精制度是否合理關系很大。只有體制健康才能保證性欲旺盛，精液品質良好。因此，要經常保持種公羊的良好體況。種公羊營養不均衡所造成的過肥、過瘦，后驅無力都會影響采精質量。所以飼養管理種公羊必須給予全價飼料，適當運動，及時護蹄，同時做好畜體和臺畜的衛生，定期檢疫。每隔半月或一個月用無菌生理鹽水加抗生素沖洗公羊的陰筒和包皮，保持局部整潔。
種公羊的日糧特點對種公羊飼料的要求是營養價值高，有足量的蛋白質、維生素和礦物質，且易消化，適口性好。好抱草有苜蓿草、三葉草、青燕麥草等。多汁飼料有胡蘿卜、甜菜或青貯玉米等。精料有玉米、高粱、豆餅、麥麩等。優質的禾本科和豆科混合的干草為種公羊的主要飼料，一年四季，應盡量喂給。夏季補以半數青割草，冬季補以適量青貯料。日糧營養不足之數，要補充混合精料。精料中不可多用玉米或大麥，且麩皮、豌豆、大豆或餅渣類補充蛋白抽。配種任務繁重的優秀公羊可補動物性飼料。
二． 采精
1.場地
要有固定的采精場所，以便使種公羊建立交配的條件反射，如果在露天采精，則采精的場地應當避風、平坦，并且要防止塵土飛揚。采精時應保持環境安靜。室內附設噴灑消毒和紫外線照射殺菌設備，每周消毒一次。
2.采精前準備
找一只健康的、體格大小與公羊相似的發情母羊做臺羊。采精時，先將臺羊固定在采精架上。臺畜的后驅，特別是尾根、外陰、肛門等部位應洗滌，擦干保持清潔。
在牽引公羊到采精現場后，不要使他它立即爬跨臺羊，要控制幾分鐘，再讓它爬跨，這樣不僅可增強其性反射，也可提高所采取精液質量。采精公羊的羊體保持清潔，采精前須用溫水沖洗陰莖，包皮，剪掉過長的陰毛。然后再用滅菌生理鹽水沖洗干凈。
將各種器械提前消毒、殺菌準備好。假陰道在使用前要洗滌，安裝內胎，消毒，晾干，注水，涂潤滑劑，調節溫度和壓力。
注入相當于假陰道內外殼間容積1/2—2/3的溫水來維持內部溫度，水溫約50—55℃，以采精時假陰道溫度達40—42℃為目的。注入水和空氣來調節壓力，應以充氣后內胎外口呈現內三角且不凸出為佳。用消毒的液體石蠟或凡士林涂抹假陰道表面增加潤滑度，其涂抹度以假陰道長度的1/2為宜。
圖 假陰道
3.采精
采精人員用右手握住假陰道后端，固定好集精杯，并將氣嘴塞朝下，蹲在臺羊的右后側，讓假陰道靠近公羊臀部，當公羊跨上母羊背上的同時，應迅速將公羊的陰道導入假陰道內，切忌用手抓碰摩擦陰莖。當種公羊后驅急速向前用力一沖，即已射精，此時，順公羊動作向后移下假陰道，并迅速將假陰道豎起，集精杯一端向下，然后打開活塞上的氣嘴，放出空氣，取下集精杯，用蓋蓋好送精液處理室待檢。
圖 羊電子采精器（公羊性欲低下）
4.采精頻率
根據種公羊的年齡，體況和季節等影響采集因素，合理安排采精頻率，使種公羊的生產潛力得到充分發揮。在良好的飼養管理條件下，1.5歲以后的育成羊，其活重達到成年羊體重的60%～70%時可以開始繁殖配種。24月齡以上的成年公羊每天采精2次，每次射精2次，每次采精時隔在40分鐘以上。每6—7天休息一次。
三． 精液檢查
1.外觀評定
1）射精量：采精后，將精液倒入有刻度的玻璃管中觀察即可。
2）云霧運動：用肉眼觀察新采的公羊精液，可以看到由精子活動所引起的翻騰滾動極似云霧狀。精子的密度越大，活力越強者，其云霧狀越明顯。
3）色澤：羊的正常精液呈乳白色或乳黃色。
4）精液的氣味：剛采的正常精液略有腥味。
2.精子活力
采精后，用滴管攪勻并從中取一滴滴在載玻片上進行鏡檢，同時利用，密度儀測密度，活力大于等于70%（0.7）的精液進行稀釋。顯微鏡恒溫臺或保溫箱溫度不得低于30℃，室溫不得低于18℃。
圖 ACCUCELL精子密度儀（精確測量）
圖 CEROSII計算機輔助精子分析系統（CASA ）
四． 精液稀釋
1.稀釋
1）采集的精液應在30℃條件下做稀釋處理。在稀釋過程中防止溫度突然升降。若迅速降溫到10℃以下時，由于冷刺激精子，可能出現冷休克。
2）采精后及時稀釋，未經稀釋的精液很難存活較長時間。
3）稀釋液與精液的溫度必須調整一致。
4）稀釋時，稀釋液沿瓶壁緩緩倒入，不要將精液倒入稀釋液中。稀釋后將精液容器輕輕轉動，混合均勻，避免強烈振蕩。
5）如果做高倍稀釋，應分次進行，避免精子所處環境劇烈變化。
6)精液稀釋后立即進行鏡檢，如果活率下降，則說明操作不當。
采用OVIxcell新一代羊用無動物源成分精液濃縮稀釋液。
根據OVIxcell使用說明，原精采集后送到實驗室時用OVIxcell以1：1的比例預稀釋。在稀釋時稀釋液的溫度必須與原精溫度相同（+/-1oC）。在做精子檢測評估時（活力、濃度等），預稀釋后的原精需保存在水浴箱中，溫度范圍在30-32oC之間，在水浴箱內時間不能超過10分鐘。精子檢測后再進行常規稀釋。此時，原精需被動降溫到室溫（20-23oC），同時在此溫度下進行精液細管封裝。另外，OVIxcell也適用于在4oC下進行精液細管封裝。稀釋后的精子在4oC下最少要平衡2個小時。
用OVIxcell稀釋的精液在顯微鏡下會呈現非常清晰的圖像，非常適合計算機輔助精子分析（CASA）。
細管冷凍：冷凍架上的細管在用液氮蒸汽冷凍時應該距離液氮液面4公分，或者用專業冷凍儀冷凍到-140oC。自動冷凍儀冷凍過程需要持續約7分鐘（0.25ml細管）。
五． 細管包裝
將稀釋好的精液進行灌裝打印。
1）精液灌裝前，應將精液搖勻后再緩慢倒入錐形瓶中，精液倒入不要過快以免對精子造成損傷。根據精液量電腦設置0.25ml細管打印數量，編碼，打印。
2）打印后要檢查羊號和日期。再灌裝，封口。檢查封口是否完整無誤，灌裝完計數過程中發現空管或沒吸滿的要挑出廢棄，在分裝時不要與精液接觸時間太長以免精液溫度回升。
六． 降溫平衡和冷凍
稀釋后的精液，采用逐漸降溫法。在1—1.5h內，使稀釋精液的溫度降到4—5℃；然后再在同溫的恒溫容器內平衡2—4h。平衡、封裝后的細管精液上架碼放是應注意細管擺放方向，把棉塞封口端靠近操作者，超聲波封口端遠離操作者，入Digit-cool程序化冷凍儀時亦應如此放置。每架上放上根類似于細管的標記物，一只羊用同一顏色的標記物，便于識別。如同一架上有不同羊的細管精液，要分開碼放，兩只羊之間要隔開一些距離，以免混淆。
Digit-cool程序化冷凍儀是全自動冷凍設備。冷凍儀與低溫柜應盡量靠近，開啟液氮罐閥門把冷凍儀降溫4℃，關閉風扇電源，待風扇完全停止后把已排滿待凍細管的架子迅速放入冷凍儀，蓋嚴蓋子按電腦預先設定好的最佳冷凍曲線程序自動完成冷凍過程。如果凍精細管數量不足時，要填充備用塑料管和細管架以保持最佳冷凍曲線程序自動完成冷凍過程，確保凍精質量。
精液冷凍過程中要求溫度必須直線下降，不得回升。特別是不得進入精子冷凍-15—-50℃的危險溫區，使精細胞內出現冰晶而造成精子死亡。
圖 Digit-cool程序化冷凍儀羊精液冷凍曲線（理論）
七． 封裝
當細管溫度降至-144℃時，打開冷凍儀蓋子，將凍制好的細管凍精取出快速以25支包裝單位裝入特制的塑料拇指管內，迅速浸入液氮中待檢。細管數量較多的情況下可選用手動計數包裝機，以節省時間人力。
圖 手動計數包裝機
八． 冷凍后活力檢測
解凍后在37℃環境下前進運動精子占總精子數的百分率為精子活力。羊冷凍精液的前進運動精子數是評價凍精產品質量的一項重要指標之一。該項指標不僅與受胎率有關，而且關系到凍精產量及優秀種公羊遺傳資源的利用率。因此有效精子數要達到國家標準（GB4143-2008）每劑前進運動精子數>1500萬個。
解凍溫度如同精液冷凍一樣，冷凍精液在融解過程中同樣也要順利通過危險區，不會對精子造成冰晶損傷，目前常用解凍溫度為38℃左右，解凍10s即可。用紙將解凍后的精液細管擦干，將精液滴在載玻片上進行鏡檢，經檢查合格的入庫保存，不合格的廢棄。解凍后精液活力應保持在35%以上。
九． 冷凍精液的保存
凍結的細管精液，抽樣樣品經解凍檢查合格后，按品種、編號、采精日期、型號標記、包裝，轉入液氮罐，貯存備用。
1）凍精應貯存于液氮罐的液氮中，貯存凍精的低溫容器應符合GB/T5458標準規定。
2）設專人保管，每周定時加一次液氮，保證凍精始終浸在液氮中。
3）每只公羊的凍精應單獨貯存。
4）貯存凍精的容器每年至少清洗一次并更換新鮮液氮。
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