-
-
- 首頁 >> 抗生素濃度對牛冷凍精液質量的影響
-
-
抗生素是稀釋液里必不可少的藥品，無論是進口的成品稀釋液還是自己配的稀釋液都缺少不了，它是抑制精液里的細菌生長繁殖的有效藥品。但是稀釋液里加多少抗生素合適，是不是說加的抗生素越多越好呢，我們通過下面的試驗來告訴大家。以下實驗結果是北京奶牛中心檢測得出。
摘要：本試驗用添加了不同濃度抗生素的稀釋液對5頭種公牛精液進行稀釋、封裝和冷凍，檢查牛凍精解凍后的精子活力、畸形率和細菌數。結果表明，抗生素添加范圍在1000～2000IU/mL內，凍精活力≥35%，細菌數控制在30個左右，凍精質量符合國家標準。
關鍵詞：抗生素；牛冷凍精液；細菌數；精子活力
種公牛精液質量關系到各地種牛站和廣大奶農的切身利益，其中微生物指標是直接影響到牛冷凍精液產品質量的因素之一。各個種公牛站除了加強種公牛采精和凍精制作過程管理以外，還在凍精稀釋液中添加了適量的抗生素來抑制牛凍精中微生物的生長繁殖。抗生素添加量的多少除了對凍精細菌數有直接作用外，是否還會影響牛凍精解凍后的活力和畸形率呢？本試驗就不同濃度抗生素對牛凍精解凍后的精子活力、畸形率和細菌數進行初步研究和分析，以期得到合理的抗生素添加量，為種公牛凍精生產積累試驗數據。
1 材料和方法
1.1 試驗種公牛的選擇
選北京奶牛中心種公牛站健康無病、性欲旺盛、鮮精活力≥75%的荷斯坦成年種公牛5頭，年齡為6～10歲，試驗牛編號1～5。按《種公牛飼養管理技術規程》要求進行公牛的飼養管理，采精員和試劑配制員均為固定人員，采精器械同批次消毒過，每頭牛采精2次，間隔30min。
1.2 儀器設備及試劑
相差顯微鏡(日本奧林巴斯)、精子密度測定儀(法國卡蘇)、細管灌裝一體機(法國卡蘇)、電子天平PB203-N（中國梅特勒）、超凈化工作臺（中國蘇凈）、顯微電視系統（韓國三星）、青霉素鈉/硫酸鏈霉素（華北制藥廠）、雞蛋（種雞場3天內生產）。
1.3 稀釋液的配制
稀釋液為自己配制的卵黃稀釋液。將制作好的稀釋液分成13等份，分別添加不同濃度的青鏈霉素濃縮液，使之成為抗生素濃度為0、200、400、600、800、1000、2000、3000、4000、5000、6000、7000和8000IU /mL的稀釋液。攪拌均勻后放置35℃的恒溫水箱中預熱備用。
1.4 精液的稀釋和冷凍
采用2次稀釋法稀釋鮮精。先用不含抗生素的稀釋液對每份鮮精進行第一次稀釋，稀釋后分成13等份。將其中一份作為對照組，只添加等量不含抗生素的稀釋液（抗生素濃度為0），另外12份分別添加含有不同濃度抗生素的等量稀釋液。稀釋后的精液中抗生素濃度分別為0、100、200、300、400、500、1000、1500、2000、2500、3000、3500和4000IU/mL，在常溫下灌裝到0.25mL細管內并封口印字，然后在4℃的低溫冰柜中平衡3～4h后，放入程序冷凍儀中進行程序冷凍。冷凍時將試驗牛的細管精液放在同一層面上，以保證冷凍環境一致。
1.5 冷凍精液質量檢查
檢查項目人員固定，并且都按照國標GB4143-2008中規定的程序進行操作，檢查凍后精子活力、畸形率和細菌數。
1.6 數據處理
對數據采用t檢驗，使用EXCEL進行處理。
2 結果
2.1不同濃度抗生素對牛冷凍精液細菌數的影響
國標中規定，細菌數為每劑量精液經培養后觀察到的細菌菌落數(細菌數≤800個為達標)。由表1可見，隨著抗生素濃度逐漸加大，牛凍精中的細菌數呈逐漸降低趨勢。為了便于分析統計，再將0～500IU/mL和1000～4000IU/mL分成2組，其中0～500IU/mL細菌數平均為58.55±65.55個，1000～4000IU/mL組為17.67±19.62個，差異極顯著(P<0.01)。
2.2不同濃度抗生素對種公牛精子畸形率的影響
國標中規定，精子畸形率為畸形精子占總精子數的百分率。畸形率≤18%為合格產品。由表2可以看出，抗生素濃度在4000IU/mL以下時，不同濃度的抗生素對種公牛凍精畸形率影響不大，均符合國標規定，且各組間差異不顯著（P>0.5）。
不同濃度的抗生素對精子活力的影響
國標中規定，精子活力為在37℃環境下前進運動精子占總精子數的百分率(活力≥35%為合格產品)。由表3可以看出，隨著抗生素濃度加大，凍精活力呈現逐漸下降趨勢。并且抗生素濃度在2500IU/mL以上時，精子活力下降明顯，且未達到國家標準。
2.4不同濃度抗生素對牛凍精質量的影響
由表4可以看出，隨著稀釋液中抗生素濃度增加，在0～4000IU/mL濃度范圍內，凍精中的細菌數呈下降趨勢，并且在大于1000IU/mL時下降明顯；凍精活力在抗生素濃度大于2000IU/mL時小于35%，沒能達到國家標準；精子畸形率不受稀釋液中抗生素濃度的影響。
3 結果與分析
從試驗結果可以看出，既要控制好凍精中的細菌數量，又要使凍精質量符合國家標準，合理的抗生素添加范圍是1000～2000IU/mL。在此范圍內，凍精活力≥35%，細菌數控制在30個左右，均符合國家標準。但是各站也因該根據自身情況制定合理添加范圍。
-
